Ultrasnabb vätskeskromatometerProminenece UFLC

Snabba analyser har alltid använts som ett viktigt tekniskt ämne, men med den snabba populariteten av LCMS har förbättrad kostnadseffektivitet blivit ett omedelbart problem och en viktig faktor för att öka hastigheten.
Snabba analyser förkortar analysetiden, oftast genom att förkorta kromatografiska kolumner eller förbättra flödet av flödesfaser. Men med den vanliga fyllningskolumnen med en partikelstorlek på 5 μm minskar separationsprestanda avsevärt vid användning av någon metod, vilket gör att snabbning är meningslös.
Följande två metoder har därför utvecklats:
• Använd fyllningsmedel med liten partikelstorlek
Denna metod gör snabb separation möjlig. Men på grund av ökningen av flödesmotståndet i kromatografiska kolumner kommer trycket på instrumentets komponenter och kromatografiska kolumner också att öka avsevärt.
• Högtemperaturseparation
Högre temperaturer kan påskynda spridningen av ämnet, samtidigt som det minskar flödesmotståndet i kromatografiska kolumner och möjliggör snabb separation. Högtemperaturanalys är effektiv när det gäller att sänka kolumntrycket, men hög temperatur orsakar försämring av kromatografiska kolumner, orsakar provnedbrytning och andra brister som behöver uppmärksammas vid tillämpning.
För att lösa problemet med baktrycket utvecklades speciella instrument för att förbättra tryckförmågan, vilket oftast är dyrare. Dessa dedikerade instrument var dock tvungna att kompromissa när det gäller provtagningsprestanda och känslighet. Dessutom är fyllningsmaterial för fin fyllningskolumn, höga krav på hårdvara, och den analytiska metoden som utvecklats med denna kromatografiska kolumn offrar mångsidighet. Om detta instrument används i konventionell HPLC-analys kommer effektiviteten att bli lägre.
Prominence stöder snabb separation
Prominence använder standardkomponenter som både uppfyller forskarnas behov för traditionell analys och höghastighetsanalys och stöder driftstemperaturer upp till 85 ° C, vilket möjliggör snabb analys vid lägre tryck, samtidigt som instrumentet återspeglar analytiska prestanda och flödesnivåer som inte är vanliga även i dyrare instrumentkonfigurationer.
Prominence UFLC stöder snabb analys med följande funktioner:
• Små kolumnrör och cirkulationspooler med liten volym minskar effekten av extrakolumn toppbredd.
• Använd en kromatografisk kolumn Shim-pack XR-ODS med en partikelstorlek på 2,2 μm.
Shim-pack XR-ODS är en ny generation av snabbanalys kromatografiska kolumner som tar hänsyn till ovanstående fyllningsmaterial finering, smart hitta en balans mellan separationseffektivitet och tryck för att förbättra eller bibehålla separationseffekten samtidigt som analystiden förkortas.

Chromatographic conditions; column: described above, mobile phase: water/acetonitrile (3/7,v/v), flow rate: described above, temperature: 40 ℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(XR-ODS), 10μL(VP-ODS).
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
• Prominence SIL-20A automatisk provtagning ger supersnabb provtagning på 10 μl i 10 sekunder.

Chromatographic conditions; column: Shim-pack XR-ODS(3mm i.d.×30 mm, 2.2μm), mobile phase: water/acetonitrile(4/6 to 2/8 in 0.4 min, convex gradient), flow rate: 3mL/min, temperature: 80 ℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(each 800 nm ol),.0.1 min delayed injection.
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
Stöd för högtemperaturanalys upp till 85 °C.
Temperatur och snabb analys: När kolumntemperaturen stiger ökar antalet teoretiska tornskivor, kolumneffekten ökar och kolumntrycket minskar.

Chromatographic conditions;
mobile phase:　water/acetonitrile (3/7, v/v),
detection: absorbance at 245 nm.
Toppar: 1: Fenyleceton 2: Fenylaceton 3: Fenylbutenon 4: Fenylpentenon 5: Fenylhexon 6: Fenylenthanton 7: Benzinon
Temperaturens inverkan på föreningar: Högtemperaturanalys är effektiv när det gäller att sänka kolumntrycket, men hög temperatur orsakar försämring av kromatografiska kolumner, orsakar provnedbrytning och andra brister som behöver uppmärksammas vid tillämpning. Högtemperaturanalys används bara som ett hjälpmedel för snabb analys.
• En detektor med hög provtagningsfrekvens som möjliggör snabb datainsamling utan att förlora information.
• Specialiserad kromatografisk metodkonverteringsprogramvara som gör det enkelt att konvertera konventionella kromatografiska villkor till UFLC-villkor, vilket garanterar mångsidighet i analysmetoder.

Reproduktivitet för snabb analys
Det är svårare att uppnå återupptagbarhet av komponentens retentionstid vid snabb separation än vid konventionell analys. Reproduktiviteten av behållningstiden (RSD) och kvadratrötningen av tiden ökar i omvänd proportion, så strängare vätskefördelningsprestanda än vanlig analys krävs. Prominence UFLC garanterar en överlägsen kapacitet för mikrostrokeförsörjning med en lösning på 3 nL/min och en kontroll på 0,1 sekund vid gradientförsörjning, vilket ger en mycket överlägsen återupptagbarhet av behållningstiden.

Vad är High Flow
Målet med snabb flytande kromatografi är hög flöde, det vill säga att fler prover analyseras varje dag eller varje timme. För att uppnå ett högt flöde måste inte bara analysetiden för enskilda prover förkortas, utan även hela cykeltiden för provning och analys optimeras. Syftet med att sträva efter snabbhet är inte bara att förkorta analysens tid utan också analysens cykel. Prominence UFLCs provinjektionshastighet är 10 sekunder, vilket gör att analysecykeln kan förkortas avsevärt.

Tillämpningsexempel

UFLC-analys av PTC-deriverade aminosyror

Aminosyroanalys har två detektionsmetoder, en är kolonn efter derivation efter separation med jonutbyte kromatografi, en annan är kolonn före derivation efter först derivation, med hjälp av omvänd kromatografi kolonn för separation. Från ett perspektiv av snabb analys, före kolumn derivation metoden fungerar effektivt. Här utfördes aminosyroanalys under kortare tid med Shim-pack XR-0DS.
Derivation med benylisocyanat. Efter kolumn derivation tar 1 timme, och före kolumn derivation tar 25 minuters analys kan förkortas till 4 minuter när konventionella kromatografiska kolumner används.

Analys av UFLC

Färgämnen som läggs till i livsmedel är syntetiska och naturliga föreningar som är högt vattenlösliga och ofta analyseras med HPLC. Men det tar lång tid att analysera samtidigt när flera färgkombinationer gör. Här presenteras ett exempel på samtidig pigmentanalys med Shim-pack XR-ODS ultrasnabb LC. Resultaten av en samtidig analys av tolv komponentpigmenter är följande kromatografi. Med konventionell LC tar analysen 50 minuter, medan med ultrasnabb LC tar analysen cirka 6 minuter.

UFLC-analys av polycykliska aromatiska kolväten (PAH)

PAH är en kemikalie som bedömer hur mycket avgaser som fordon förorenar atmosfären. PAH är starkt cancerogena, så atmosfärisk övervakning av dessa ämnen är ett viktigt mätprojekt. PAH visar stark fluorescens och kan användas för högkänslig analys av fluorescensdetektorer.
För analysen av dessa 10 PAH:er uppnådde UFLC en 10 gånger snabbare analys (analystid 5 minuter) i förhållande till konventionell LC (analystid 50 minuter) utan förlustfri separation.